脑胶质瘤特异性启动子的构建和应用 |
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掌桥科研
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阅读量: 142 作者: 田永吉 展开 摘要: 脑胶质细胞瘤是中枢神经系统常见原发恶性肿瘤,恶性程度高,手术后易复发,预后差,现有治疗手段均不能显著改善该类患者的预后.由于胶质瘤具有原位复发的特性使之非常适合基因治疗.本课题利用基因克隆技术,构建出全长的GFAP启动子和hTERT启动子,分别连接到含报告基因的真核表达载体pGL3-Basic.rAAV基因表达框的容量仅有5.3kb,因此治疗基因选用仅有569bp的促凋亡基因Bax α,构建以GFAP/hTERT-Bax α真核表达载体.体外转染bt325细胞系,72小时后EB,丫啶橙染色,胶质瘤细胞呈现凋亡.本课题成功构建了胶质细胞特异性的GFAP和hTERT启动子,体外实验初步证实有效性和特异性,并且有效介导Bax α基因表达,诱导胶质细胞的凋亡;成功构建6HRE-GFAP杂合启动子,在低氧环境可以显著增强表达,是一个脑胶质瘤特异性的高效启动子,有广泛的研究应用前景;成功构建GFAP/hTERT-promoter-Bax α表达载体,为下一步制备胶质细胞特异性rAAV5对胶质瘤的基因治疗奠定了基础. 展开 关键词: 胶质瘤 基因治疗 重组腺相关病毒 胶质细胞纤维酸性蛋白 端粒末端转移酶逆转录酶催化亚单位 学位级别: 博士 学位年度: 2004 |
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